在規定的條件下，微生物分解水中的某些可氧化的物質，特別是分解有機物的生物化學過程消耗的溶解氧。五日生化需氧量（BOD5）通常情況下是指水樣充滿密閉的溶解氧瓶中，在(20±1)℃的暗處培養5d±4h，分別測定培養前后水樣中溶解氧的質量濃度，由培養前后溶解氧的質量濃度之差，計算每升樣品消耗的溶解氧量。

地表水、工業廢水和生活污水

1. 非稀釋法：BOD5不大于6mg/L，樣品中有足夠微生物。

2. 非稀釋接種法：BOD5不大于6mg/L，樣品中無足夠微生物。

3. 稀釋法：BOD5大于6mg/L，樣品中有足夠微生物。

4. 稀釋接種法：BOD5大于6mg/L，樣品中無足夠微生物。

1. 質控樣品

（可進入或小程序進行查看）

2. 接種液

可購買接種微生物用的接種物質或選擇未受工業廢水污染的生活污水、含有城鎮污水的河水或湖水、污水處理廠的出水。

3. 鹽溶液

磷酸鹽緩沖溶液，硫酸鎂溶液，氯化鈣溶液，氯化鐵溶液

4. 葡萄糖-谷氨酸標準溶液

將葡萄糖（C6H12O6，優級純）和谷氨酸（HOOC-CH2-CH2-CHNH2-COOH，優級純），在130℃干燥1h，各稱取150mg溶于1000mL水中，此溶液的BOD5為(210±20)mg/L，現用現配。

5. 稀釋水

在5~20L的玻璃瓶中加入一定量的水，控制水溫在(20±1)℃，曝氣使稀釋水中的溶解氧達到8mg/L以上。使用前每升水中加入上述四種鹽溶液各1.0mL，混勻，20℃保存。

6. 接種稀釋水

每升稀釋水中加入適量接種液，接種稀釋水pH值為7.2，空白試樣測定BOD5應小于1.5 mg/L。

接種稀釋水帶標試樣測定：取20 mL葡萄糖-谷氨酸標準溶液于稀釋容器中，用接種稀釋水稀釋至1000mL，BOD5測定結果應在180~230mg/L范圍內。

7. 稀釋倍數的確定

按照有證標物給定的樣品濃度范圍和HJ 505-2009要求，樣品稀釋的程度應使消耗的溶解氧質量濃度不小于2mg/L，培養后樣品中剩余溶解氧質量濃度不小于2 mg/L，且試樣中剩余的溶解氧的質量濃度為開始濃度的 1/3~2/3為最佳。當不能準確地選擇稀釋倍數時，一個樣品做2~3個不同的稀釋倍數。

稀釋倍數的確定可先根據總有機碳（TOC）、高錳酸鹽指數（IMn）或化學需氧量（CODCr）的值及其與BOD5的比值（表一）估計BOD5的期望值，然后按表二確定稀釋倍數。

表一

（來源：HJ 505-2009）

表二

（來源：HJ 505-2009）

8. 測定結果

（來源：HJ 505-2009）

結果報告中應注明：樣品是否經過過濾、冷凍或均質化處理。

1. 溫度

水溫和溶解氧成反比，水溫低時溶解氧高，水溫高時溶解氧低^[1]。測定時，必須嚴格控制樣品溫度為(20±1)℃，以確保試驗的準確性。

2. pH值

pH值對微生物的活性有較大影響，過高或過低都會影響分析結果，樣品pH值應在6~8范圍內，最佳為7.2^[2]。

3. 稀釋倍數

稀釋倍數偏小，樣品的測定結果容易偏低，稀釋倍數過大，結果容易偏高^[3]。

4. 硝化抑制劑

若試樣中含有硝化細菌，有可能發生硝化反應，需在每升試樣中加入2 ml丙烯基硫脲硝化抑制劑。

5. 余氯和結合氯

污水處理廠的出水中含余氯和結合氯，其會抑制微生物活性，使BOD5的測定結果偏低，可加入過硫酸鈉消除余氯和結合氯的影響[3]。

參考文獻：

[1] 張麗. 稀釋與接種法測定五日生化需氧量的影響因素分析[J]. 山西化工, 2023, 43 (11):65-67.

[2] 陳美瑩. 稀釋與接種法測定五日生化需氧量的影響因素[J]. 山西化工, 2025, 45 (05):110-112.

[3] 朱智慧, 徐錫梅, 章文華, 等. 稀釋接種法測定五日生化需氧量的影響因素[J]. 凈水技術, 2022, 41(6):170-174, 186.